抑制幽门螺杆菌中药的筛选
幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）于1983年由Warren和Marshal首次从胃粘膜活检标本中分离并命名。越来越多的证据支持Hp是胃炎的致病菌，Hp感染与消化性溃疡的发病也密切相关。中医药治疗慢性胃炎及消化性溃疡取得了良好效果，为进一步提高疗效，探讨其机理，我们从不同性味，不同作用的200种中药中作初步筛选，发现其中38种中药对Hp有抑菌作用。现将结果报道如下。
1 材料和方法
1.1 Hp培养鉴定
患者因上消化道症状行胃镜检查226例，并诊断为慢性胃炎或消化性溃疡。其中男175例，女51例，年龄16岁～70岁，平均39.1岁，病程3月～2a。本组病例排除了肝、肾和血液系统疾病。胃镜检查前1周，患者未用抗生素，铋剂和影响胃酸分泌的药物。Olympus胃镜及活检钳均用2％戊二醛浸泡消毒15min，使用前用清水冲洗。选慢性胃炎和消化性溃疡患者，用19K活检钳在胃窦部距幽门5cm范围内取胃粘膜标本2块，以无菌手续接种在改良Skirrow培养基（含万古霉素10mg/L、多粘素B2500IU/L、TMP5mg/L）。培养基放在10％CO[XB]2[/XB]、5％O[XB]2[/XB]和85％N[XB]2[/XB]条件下，37℃培养72h。226例均作了Hp培养。Hp菌落为半透明、灰色、湿润、稍隆起圆形。菌体革兰染色阴性，呈弯曲，“S”形或“海鸥”形。生化鉴定：尿素酶阳性，氧化酶阳性，在三糖铁培养基上不发酵。不产H[XB]2[/XB]S，醋酸铅试纸法H[XB]2[/XB]S（＋），对1％甘氨酸部分耐受，不还原硝酸盐，不水解马尿酸。
1.2 山药抑菌试验
中药煎液制备 将单味中药分别浸泡，于烧杯中60min，在100℃条件下煎煮30min，取1：1（1g中药煎出1ml药液）煎液存放于无菌试管备用。
抑菌试验材料 改良Skirrow培养基，Hp悬液（10[SB]8[/SB]/ml），无菌海绵块（圆形，厚2.5mm，直径6.5mm，吸液量30μl/块），中药煎液，5％NaCl。方法：将Hp悬液均匀接种在改良Skirrow培养基上，用海绵块吸取中药液分别放置于上述培养基，5％NaCL未出现抑菌环，无抑制Hp作用。其抑菌环的大小，显示出不同中药对Hp的不同抑菌程度，结果见表1。
表1 中药对Hp抑菌结果
| 药名 | 抑菌环(mm) | 药名 | 抑菌环(mm) | 药名 | 抑菌环(mm) | 药名 | 抑菌环(mm) |
| 黄 芩 | 25 | 山 楂 | 22 | 槟 榔 | 16 | 旱莲草 | 12 |
| 黄 连 | 25 | 厚 朴 | 20 | 五味子 | 16 | 麦 冬 | 12 |
| 大 黄 | 24 | 枳 实 | 19 | 生黄芪 | 15 | 元 胡 | 12 |
| 黄 柏 | 24 | 白 芍 | 19 | 艾 叶 | 15 | 苍 术 | 11 |
| 桂 枝 | 23 | 香 附 | 17 | 没 药 | 15 | 女贞子 | 10 |
| 地 丁 | 23 | 青天葵 | 17 | 毕 菝 | 15 | 川楝子 | 10 |
| 玫瑰花 | 23 | 地 榆 | 17 | 草豆蔻 | 15 | 黄 精 | 9 |
| 土茯苓 | 23 | 连 翘 | 17 | 瓜 蒌 | 15 | 生侧柏 | 9 |
| 高良姜 | 22 | 茵 陈 | 16 | 远 志 | 14 | 5％Nacl | 0 |
| 乌 梅 | 22 | 苦 参 | 16 | 金樱子 | 14 |
2 讨论
Hp感染与慢性胃炎及消化性溃疡的关系越来越受到重视。本组226例中60.2％检出Hp，与文献报道接近。多年来国内用中医药辨证治疗胃炎和消化性溃疡取得了良好效果，为探讨Hp这一致病因素与中药治疗胃胃及消化性溃疡间的作用，我们做了常用中药对Hp的抑菌实验，中药均选自不同性味、不同作用的单味药。在200种药中筛选出38种有不同大小的抑菌环出现，说明有抑菌作用。5％NaCl作为高渗透压作用的对照表明，未见抑菌环出现，无抑菌作用，故可排除中药煎剂可能产生的高渗透压作用而出现假性抑制Hp生长作用。
经体外实验初步筛选的38种中药对Hp有抑菌作用，其中以黄芩、大黄、黄柏、桂枝、地丁、玫瑰花、土茯苓、高良姜、乌梅、山楂等抑菌作用最明显，最大抑菌环为25mm。张琳等曾用牛津杯法其实验结果见黄连抑菌作用明显，我们所作结果与之相符。但其所见黄连抑菌环达41mm,可能与实验条件、方法等不同有关。我们所见党参、枸杞子对Hp无明显抑菌作用，与之报道不符；我们所见土茯芩、玫瑰花、高良姜等抑蓖作用明显，但尚未见报道。
临床实践中，我们体会到选用对Hp有良好抑菌作用的中药综合辨证论治组方，对于患者临床症状的减轻和消除，病理组织学的改善均有良好的促进作用。梁方信等报道Hp阳性的胃病51例后，66.7％Hp仍为阳性，而94.1％患者可达到组织学康复或好转。我们在临床中亦发现有相同的一些病例，但对这部分Hp阳性，无临床症状，胃镜下所见及病理组织学查检已见有明显好转的患者继续治疗，则发现Hp仍可转为阴性。因此，我们考虑Hp感染只不过为胃炎、消化性溃疡的致病因素之一。中医药治疗疾病确有其独到之处，在注重局部病变的同时，更注重整体的调节。所以，对于慢性胃炎和消化性溃疡的治疗，Hp应受到重视，但更应切记辨证论治原则。
本结果为阳性胃炎和消化性溃疡的治疗提供了针对Hp感染的用药依据，而复方制剂与不同剂型的中药对Hp的清除作用，目前仍在进一步实验研究中。