《中华本草》:蜜环菌
拉丁植物动物矿物名:Armillariella mellea (Vahl.ex Fr.) Karst.[Agaricus melleus Vahl.ex Fr.]
采收和储藏:7-8月采收子实体,去净泥土,晒干。
生态环境:生于阔叶树及针叶树的根部、树干基部、倒木及林中地上,丛生或群生。
资源分布:分布于东北、华北、西南及陕西、甘肃、新疆、浙江、福建、广西、西藏等地。
1.生物学特性 蜜环菌是兼性寄生菌,子实体在12-20℃温度范围内都可形成,以15-18℃最适宜,相对湿度85%-95%,散射光100-500lx 适宜子实体分化生长,菌丝体在8-28℃下均可生长,以25℃最适宜,不需光。蜜环菌为好气菌,适宜的酸碱度为pH5-5.5。菌丝体发光。
2.培育技术 蜜环菌采用发酵培养技术,其工艺流程:斜面菌种培养(24-26℃,15-20天)→一级种子培养(24-26℃,5-6天)→二级种子培养(26-28℃,4d左右)→种子罐培养(26-28℃通气量(V/V)1:0.3-0.5/mim,4-5天)→发酵罐发酵(26-28℃通气量1:0.5-0.8分钟,6-7天)→出罐、过滤(板框或离心机)→菌丝体,发酵液浓缩至膏状→混合、烤干(65-75℃)、粉碎、压片2.(1).菌种分离培养 选健壮新鲜子实体,用乙醇表面消毒后,在无菌条件下挑取菌柄与菌盖接触处一块组织,置于PDA培养基上(马铃薯200g煮水,葡萄糖20g,琼脂20g,pH自然,灭菌后作成斜面),分离出纯菌种后,用PDA培养基扩大培养成斜面菌种。
(2). 种子培养:培养基为葡萄糖2%,磷酸二氢钾0.15%,硫酸镁0.075%,蚕蛹粉0.5%,维生素B1 0.001%,麦麸5%煮汁。用一支斜面菌种接一瓶(100ml培养基/500ml三角瓶),摇床180r/mim培养5-6d。转入二级种子,在同上培养基上用往返式摇床90r/mim培养4d。转入三级种子罐培养,搅拌速度150-180r/mim培养4d。种子培养接种量为10%。
(3). 发酵培养 培养基为葡萄糖2%,蔗糖1%,蚕蛹粉1%,豆饼粉或黄豆饼粉1%,磷酸二氢钾0.15%,硫酸镁0.075%,接种量及发酵条件与种子罐相同,培养6-7d。
发酵终止及发酵物处理 发酵终止的标准为菌丝体生长旺盛、发酵液棕褐色、有荧光、pH下降到5左右、残糖量降至0.3%-0.5%,即可终止出罐。发酵物用板框或离心机过滤,滤液浓缩成膏状,与菌丝体混合,于65-75℃下烘干、压片。或将滤液浓缩至原体积的1/10,制成糖浆。
1.对免疫功能的影响:蜜环菌多糖小鼠每日灌胃100mg/kg,连续5天,能显着增加正常小鼠和注射环磷酰胺所致免疫功能抑制小鼠的溶血素生成。小鼠每日口服蜜环多糖50mg/kg和100mg/kg,连续5天,能显着增加正常小鼠的空斑形成细胞数,其中以50mg/kg剂量组作用更为显着。体外实验,蜜环菌多糖10μg/ml和50μg/ml可显着增强刀豆素A(Con A)诱导的小鼠淋巴细胞增殖反应,但对二硝基氯苯(DNCB)所致的小鼠迟发型过敏反应无显着增强作用。此外,蜜环菌多糖还能增加小鼠静注碳粒廓清速率及腹腔巨噬细胞的吞噬百分数和吞噬指数。另有报道大鼠连续腹腔注射蜜环菌提取物(2.5g/kg/天5天,或给小鼠皮下注射此药(2.5g/kg/天)11天,均可使胸腺重量减轻,但脾重量有所增加,并且连续皮下注射蜜环菌提取物(2.5g/kg/天)7天,对绵羊红细胞(SRBC)致敏小鼠溶血素形成无明显作用,对DNCB所致小鼠迟发型皮肤过敏反应亦无明显作用。
2.对脑缺血的保护作用:从蜜环菌菌丝体中提取得到一种新的腺苷类化合物AMG-l可延长小鼠断头张口呼吸持续时间。AMG-1小鼠皮下注射1-10mg/kg,30分钟后,能有效地减少小鼠断头全脑缺血后乳酸(LA)堆积,ATP和磷酸肌酸(PCr)的耗竭。皮下注射AMG-1 5mg/kg和尼莫地平0.5mg/kg,可减轻大鼠大脑中动脉阻断后的神经症状和神经细胞缺血性损害。AMG-l的这一改善脑缺血作用与尼莫地平相似。研究表明AMG-1在0.1-0.3mmol/L能明显抑制突触前膜Ca2+依赖性谷氨酸(glu)的释放,并呈现剂量-效应关系,因此,抑制兴奋性氨基酸释放可能是AMG-1对脑保护作用的机制之一,另一方面,无论用大鼠突触体标本或大鼠离体尾动脉环标本,均一致说明AMG-1对去极化突触体的外钙内流或尾动脉的内钙释放均有抑制作用,这可能是AMG-1对脑缺血保护作用的主要机制。
3.抗炎作用:蜜环菌提取物12.5g/kg灌胃和2.5g/kg腹腔注射,对二甲苯所致小鼠耳部炎症、角叉菜胶引起的大鼠足跖肿胀均有显着抑制作用,蜜环菌提取物2.5g/kg腹腔注射,对组织胺所致大鼠足跖肿胀和大鼠皮下棉球肉芽肿增生有显着抑制作用,对5-羟色胺引起的足跖肿胀亦有抑制趋势,但统计学处理无显着性。