《中国药典》:土贝母
照高效液相色谱法(附录Ⅵ D)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;65%甲醇为流动相;检测波长为214nm。理论板数按土贝母苷甲峰计算应不低于1500。
对照品溶液的制备 取105℃减压干燥至恒重的土贝母苷甲对照品10mg,精密称定,置100ml量瓶中,以流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml中含土贝母苷甲0.1mg)。
供试品溶液的制备 取本品粉末(过四号筛)约0.3g[同时另取本品粉末测定水分(附录Ⅸ H 第一法)],精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇50ml,称定重量,超声处理30分钟,再称定重量,用70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤25ml,水浴蒸至无醇味,加水10ml,移置分液漏斗中,用水饱和正丁醇提取4次(20ml、20ml、10ml、10ml),合并正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇溶解,转移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品按干燥品计算,含土贝母苷甲(C63H98O29)不得少于1.0%。
《全国中草药汇编》:土贝母
《中华本草》:土贝母
拉丁植物动物矿物名:Bolbostemma paniculatum(Maxim.) Franquet[Mitrosicyos paniculatus Maxim.]
采收和储藏:秋、冬两季采挖,把鳞茎洗净,在蒸笼上蒸透,晒干备用,用的打碎。
生态环境:常生长于阴山坡,但现已广泛栽培。
资源分布:分布于河北、山西、陕西、甘肃、山东、河南、湖北、湖南、四川等地。
生物学特性 喜湿暖湿润气候。耐严寒。对土壤适应慕尼黑广,但宜选择肥沃、疏松的砂壤土栽培。
栽培技术 用种子和鳞茎繁殖法。种子直播:春播于3-4月,播前种子用湿水浸泡8-12h,按行距35cm开汉条播,覆土1-2cm,每1hm2播种量30-37.5kg。鳞茎繁殖:早春或晚秋将地下鳞茎挖出,选留小者作种,按行株距40cm×cm穴栽,每穴放鳞茎1-2个,施基肥适量,覆土2-3cm。
田间管理 出苗后及时间苗,定期中耕除草、追肥。苗高15-20cm时,搭设棚架,扦插竹枝,引期中耕除草、追肥。苗高15-20cm,搭设棚架,扦插竹枝,引藤蔓上棚攀援。
1.抗肿瘤作用1.1 土贝母粗粉用氯仿冷浸,滤过,残渣用75%乙醇冷浸,乙醇提取液经回收乙醇后用乙酸乙酯萃取,萃取后的母液用正丁醇萃取,萃取后母液室温放置1wk,析出白色物质,抽滤后得白色粉状物,经硅胶层析,用氯仿-甲醇-水(70:35:10)洗脱,分别得C,DC结晶),E三部分。经小鼠接种-180后作抑瘤试验,ip给药,正丁醇萃取后母液(7.5mg/kg),白色粉状物(2.5mg/kg)结晶D(2.5mg/kg)均有明显的抑痛作用,抑瘤率>30%,P<0·001。结晶D对带瘤、、鼠的生存期有明显作用;取健康、体重18-24g小鼠,腹腔接种艾氏腹水癌或S-180,接种24h后,治疗组im结晶D生理盐水溶液,每日1次,直至小鼠开始死亡为止,对照组给于生理盐水。
1.2土贝母煎剂对小鼠宫颈癌的抑制作用 山西医学院肿癌研究组用改进的Murphy氏法基础上加以改良,建立小鼠宫颈癌模型。进行土贝母等的筛选。土贝母用水煎剂(1:1浓度)剂量100mgig给药,连续15wk,土贝母治疗组15只小鼠,实验结束后处死。肉眼可见8只有肿瘤,位于子宫颈处,镜检:8只为宫颈鳞癌,余未见,诱癌率为53%,存活率为75%,与对照组比较P<0.05,差异显着(对照组诱癌率为85%)。提示土贝母水煎剂对小鼠宫颈癌治疗上不仅有一定的抑制率,且能提高其存活率。
1.3土贝母煎剂对小鼠前胃鳞癌的影响 土贝母对小鼠前胃鳞癌具有促进作用。土贝母经山西省药品检验所鉴定品种,制剂为水煎剂,每lml相当生药2g,雌性小鼠诱癌方法采用肌氨酸乙脂盐酸盐2g/kg和亚硝酸钠0.3g/kg,分别用0.01mol/L盐酸配成20%和3%水溶液,等量混合ig给药,每周2次,共10次;土贝母对照组用剂量为50mg/kg,每周ig4次,共20次,土贝母治疗组在灌喂10次致癌物后,给土贝母50mg/kg,每周ig4次,连续20次,结果用X2检验,土贝母治疗组与致癌组和土贝母对照组比较均有显着性差异。从实验结果表明,土贝母水煎剂对小鼠前胃鳞癌不但无抑制作用,且可能具促癌作用、实验重复两次,结果相同。与其他报道有抗肿瘤作用结果相反,可能剂型等不同对实体瘤和诱发瘤均有不同的影响。
1.4土贝母甙甲对动物肿瘤亦有一定的抑制作用。
2.抗病毒作用 土贝母皂甙(原文未注明是那一种皂甙),西安医学院二附院制(批号820624)配制成每1ml含1mg的皂甙溶液。将皂甙溶稀成不同浓度(10-7-10-1mg/ml),同时将单纯疱疹病毒I(HSV-I)TCLD50作10-1稀释后进行击。各项不同浓度药液与稀释的病毒各0.5ml混合后于37℃温孵lh。每个稀释度接种3管乳兔肾细胞,吸附30min,加维持液至1ml,置36℃温箱培养,3种材料均设对照管。结果土贝母皂甙稀释浓度为10-4/10-5(即0.1ug)时对单纯疱疹病毒I型仍有抑制作用。10-6浓度以下无抑制活性,浓度1O-3以上对细胞毒性较大。
3.溶血作用 西安医学院二附院药剂科从土贝母中用稀醇冷浸,水沉淀,氧仿、正丁醇萃取,氧化铝柱层析分离精制而得的白色粉末,称为土贝母总皂苷,按广州药品检验所《中草药制剂检验技术》中的溶血试验法测定,结果土贝母总皂甙的溶血指数为1:1.064x10?。
4.杀精子作用 西安医科大学附属医院药厂制备的土贝母总皂甙及其A、D成分均有较强的杀精作用,其瞬间杀精作用的有效浓度分别为0.04%,0.04%和0.03%,其杀精机理主要是破坏精子的生物膜系统,用固定明胶底物薄膜法测定单个精子顶体酶变化的结果表明,3种成分在浓度0.05%时均可显着降低单个精子顶体酶的活性。且作用后不活动的精子用生理盐水洗去药液后活动力未能恢复,表明其损伤作用是不可逆的。
5.其他作用 本品曾用作为治疗乳腺炎、毒蛇咬伤的解毒剂。土贝母甙甲、乙、丙具有助溶作用和包合作用,能增加脂溶性色素YellowOB,消旋-a-生育酚和无患子中的皂甙A等在水中的溶解度;土贝母甙甲还能增加苯胺-荼-磺酸盐萤光素在水中的强度,可能是形成复杂的包合作用之故。
1.结晶D的毒性 土贝母粗粉用氧仿冷浸,残渣用75%乙醇冷浸,乙醇提取液经回收乙醇后用乙酸乙酯萃取,萃取后的母液用正丁醇萃取,萃取后母液室温效置1wk后,析出白色物质,再经硅胶柱层析分得结晶D。结晶D小鼠im给药,LD50为51.61mg/kg。亚急性毒性:选择健康犬12只,分为实验和对照两组。剂量分别为0.3mg/kg,0.6mg/kg和1.2mg/kg,每组3只,每天im给药1次,每周5次,共20次。对照给同体积生理盐水。结果,剂量为0.3mg/kg和0.6mg/kg的两组,在实验过程中未出现不良反应。血液学和肝肾功能检查无异常改变。解剖时肉眼可见2只犬(2/6)的脾脏增大,色紫暗。剂量为1.2mg/kg的动物,在整个实验过程中亦未见不良反应,化验检查发现白细胞计数增加。病理组织学检查发现,实验组部分动物(4/9)的肝组织呈点状坏死,脾脏出血(少量或大量含铁血色素沉着),其它动物未见明显的病理改变。
2.土贝母皂甙的毒性 小鼠ip给药的LD50为31.9±0.234mg/kg。临床治疗剂量为0.04mg/(kg·d)。亚急性毒性试验用健康家兔24只,体重2-3kg,按每日每1kgim给剂量0.08,0.8,1.2mg分为3组,另设对照组img葡萄糖液。连续给10d,给药结束后次日处死一半动物,另一半观察1wk后处死。结果在一般情况下,实验过程中家兔表现及活动未见明显异常,仅高剂量组出现食欲减退,体重略低于对照组。血液及生化检查无显着差异(P>0.05)。一般药理研究表明,土贝母皂甙注射液(每1ml含1mg),对麻醉犬的呼吸、血压和心率在分别使用0.08mg/kg、0.8mg/kg和8mg/kg时,iv给药前后均无明显差异(P<0.05)。
《中药大辞典》:土贝母
①治乳痈初起:㈠白芷、土贝母等分。为细末,每服三钱,陈酒热服,护暖取汗即消。重者再一服。如壮实者,每服五钱。㈡白芷梢、土贝母、天花粉各三钱,乳香(去油)一钱五分。共炒研末,白酒浆调搽,再用酒浆调服三钱。(《纲目拾遗》)
③治乳岩已破:大贝母、核桃桶、金银花。连翘各三钱。酒、水煎服。(《姚希周经验方》)
④治手发背:生甘草、炙甘草各五钱,皂刺二钱五分,土炒土贝五钱五分,半夏一钱五分,甲片二钱五分(炒黑),知母二钱五分。加葱、姜、水、酒煎。(《慈惠小编》)
⑤治疬串不论已破未破皆治:土贝母半斤,牛皮胶四两(敲碎,牡蛎粉炒成珠,去粉为细末)。水发丸,绿豆大,每日早晚,用紫背天葵根三钱,或用海藻、昆布各钱半,煎汤吞丸三钱。
⑥治疬串:牛皮胶(水熬化)一两,入土贝母末五钱,摊油纸上贴之。
⑦治鼠疮:大鲫鱼一尾,皂角内独子,每岁一个,川贝母二钱,土贝母二钱。将皂角子、贝母、入鱼肚内,黄泥包裹,阴阳瓦炭火焙干,存性,研细末。每服三钱,食后黄酒调服,忌荤百日。(⑤方以下出《纲目拾遗,)
⑧治颈淋巴结核未破者:土贝母三钱,水煎服,同时用土贝母研粉,醋调外敷。(《陕西中草药》)
⑨治毒蛇咬:急饮麻油一碗,免毒攻心,再用土贝母四、五钱为末,热酒冲服,再饮尽醉,安卧少时,药力到处,水从伤口喷出,侯水尽,将碗内贝母渣敷伤口。(《祝穆试效方》)